Ploskireva medium (Bacto-agar F): beskrivelse. Medicinsk mikrobiologi

Ploskireva medium (herefter stadig Bacto agar F) er et næringsmedium til dyrkningen af visse mikroorganismer, primært Shigella og Salmonella. Som en kilde til hendes brug inficerede materialer: urin, galde, fæces.

historie

Nikolay Ivanovich Ploskirev - sovjetiske mikrobiolog og hædret læge. Han blev født i 1869 og døde i 1948, efter at have arbejdet det meste af sit liv i sin hjemby - Tomsk.

I 1888, han, den fremtidige videnskabsmand, uden at gennemføre sjette klasse skole, sluttede sig til hæren. han var i stand til at fuldføre uddannelse kun i 1892, derefter bestået prøverne for adgang til den kejserlige Tomsk Universitet, studerede han ved det medicinske fakultet. I 1898 modtog han titlen som læge.

Ploskirev deltog i russisk-japanske krig, og efter det arbejdede i Tomsk hospitalet. I 1910 blev han udnævnt til posten som leder af Tomsk dermatologiske og kønssygdom hospital, og i tredive år har været dens permanente hoved. Det samme videnskabsmand var en af grundlæggerne af STI klinik i Tomsk.

Nikolay Ivanovich Ploskirev skrev en række værker, der afsættes til bekæmpelsen af kønssygdomme.

struktur

Onsdag Ploskireva - materiale til dyrkning af tarmbakterier, og derfor skal indeholde flere slags næringsstoffer. Det fremstilles i tør form.

En stor del af dens samlede vægt er pankreatisk hydrolysat brisling (10,4 g / l). Lidt mindre udgjorde hydrocitrate dibasisk natrium (8,5 g / l). Der er også en tør næringsmedium og mælkesukker (8,62 og 7,3 g / l).

Den anden titel Ploskireva medium - J. Bacto-agar i præparatet det til stede i en mængde på agar, 6,94 g / l. Seriovatistokislogo vandfrit natriumindhold lig med 5,1 g / l. Der er nærvær af vandfrit dinatriumphosphat - 2,1 g / l, natriumsalte af cholsyre ca. 3,46 g / l og soda - 2,4 g

Mindre end et gram indeholdt deri indikatorer - neutral rød (0,05) og strålende grøn (0,0002). Iodindholdet - 0,13.

ansøgning

Studiet af de biokemiske processer i bakterier spiller en meget vigtig rolle i diagnosen af sygdomme, der forårsager anaerobe organismer. Arter i denne familie - hundreder. De er næsten identiske i morfologi og kulturelle egenskaber, og mest pålidelige måde at skelne dem fra hinanden - er studiet af biokemi.

Undersøgelsen begynder med podning af patologisk materiale i dyrkningsmediet. Hun patologisk differentiale for coliforme bakterier og en del af det, ud over almindeligt agar, omfatter lys og lactose. Behandling evne laktose - et vigtigt tegn på differentiering af enterobakterier. Hvis dette konstateres, forskyder pH i retning surhed og indikatoren er aktiveret, som drejer kolonien.

Andre lande kan bruge andre næringsstoffer medier, men deres virkningsmekanisme svarer til de tre mest almindelige i Rusland - dette miljø Endo og Levine Ploskireva miljø.

Beskrivelse af fremgangsmåden

Udlandet Ploskireva analog medium er en såkaldt MacConkey agar. I færdig form gennemsigtig løsning har en lys rosa-gul farve. Kolonier kan behandle lactose, blandt Ploskireva giver rød (tranebær) farve. Hvis bakterierne ikke kan behandle det, eller koloni er farveløst eller har en svag farve.

Eftersom sammensætningen af mediet omfatter stoffer Ploskireva inhibitorer (strålende grøn, galdesalte, iod), er det næsten helt hæmmer væksten af grampositive flora, som i den første dag eshehiry signifikant forsinker vækst samt andre sædvanlige ledsagende mikroflora.

andet ben

Yderligere af interesse er det udvalg af kolonien, og den er podet på en primær lagermedium og differentiering. Miljø, hvor der er såning bør indeholde flere substrater. Bakteriekultur skal afsløre enzymatisk aktivitet med hensyn til dem, til det samme medium anbragt i rørene, således at der er to steder:

• en, hvor hældende agar;
• med en søjle.

Interessen for forskere i kolonien befolket affasede del tætte slagtilfælde og i en kolonne - en pik. På dette trin anvendte medium Russell, Kligler eller Olkenitskogo. Som differentialdiagnose brugt og Ploskireva onsdag.

Mikrobiologi og patogene organismer

Agar Ploskireva er en vigtig faktor i at detektere infektioner forårsaget af Enterobacteriaceae. Så for eksempel, er det vokset og differentierede kolonier af mikroorganismer, som forårsager bakteriedysenteri. Denne anaerobe organismer, der tilhører slægten Schigella.

Ligesom alle, der er del af en familie af tarmbakterier, shigella har form af stænger, størrelsen af to mikrometer. De udgør ikke kapsler og sporer har flageller - det giver dem mulighed for at blive adskilt fra Salmonella, som til gengæld er mobile. De vokser godt på de fleste enkle medier, ved en temperatur lidt over omgivelsernes (35-37 ° C) og 7,4 pH. Ved karakteren af vækst, behøver kolonier ikke fra Salmonella.

Som diskuteret ovenfor, kan mikroorganismer være i det væsentlige morfologiske forskelle imidlertid variere betydeligt i biokemiske processer i livet. Således, bortset fra Shigella Nyukestl, uden dannelse af sur gas forekommer under fermentering af kulhydrater. Med undtagelse af Shigella sonnei, kan de ikke fermentere lactose, men fordøjes glucose. Blot for at deres vigtigste funktioner, kan du bære dem, hvad de kan for at reducere niraty til nitrit. Deres kolonier blev fordøjet med urinstof, samt i dyrkningsmediet er ingen smeltning af gelatine.

Indsamling og udarbejdelse af frø

For at detektere agenter for dysenteri, kræves mikrobiologiske forsøg angrebne miljøer, dvs. fæces patient. Efter modtagelsen af materialet, du har brug for så hurtigt som muligt at gøre såning. Hvis dette ikke er muligt, skal kilden anbringes i et konserveringsmiddel - phosphatbuffer blanding eller glycerol. Ved 4 ° C, kan de opbevares i mere end en dag. Indsamle materialet skal udføres ved hjælp af en rektal glasrør, som er indsat i endetarmen.

Til undersøgelser af et materiale valgt purulent slim stykker, der skal vaskes i to til tre rør isotonisk natriumchloridopløsning.

Anvendelse af patogene bakterier i miljøet Ploskireva gjort glas spatel. Du er nødt til at gnide på en lille del af sin agar, derefter rive spatel på miljøet, og det resterende materiale gnides ind i sået overflade. Hvis såning sker i et par kopper, derefter til hver af dem har brug for at plante et nyt parti.

Hvis mucokutant-purulent stykker der i at tage på en dedikeret analyse, betyder det ikke, at der ikke er forekomst af patogener. I et sådant tilfælde er det nødvendigt at emulgere afføring i 10 ml natriumchlorid (koncentration 0,85%) og derefter sow en eller to dråber på et medium Ploskireva. Ikke-emulgerede stol kan sås i selenitovy bouillon. Han brugte også, hvis der i stedet for afføring er opkast eller vaske.

Mikrobiologisk diagnostik

I den første fase af mikrobiologiske undersøgelser foretaget udsåning af sygdomsfremkaldende bakterier i to kopper, så for at se, hvordan man dyrker Shigella. Onsdag produceret Ploskireva en afgrøde, og den anden - på miljøet eller Endo Levin.

På grund af det faktum, at der var stammer af Shigella er resistente over for antibiotika, til mediet blev suppleret med chloramphenicol. Derefter sker inden dages inkubation i en inkubator ved 37 ° C.

På den anden dag til at udforske de dyrkede kolonier. De, der ikke er på forskellen diagnostiske medium vokset farveløs, er det nødvendigt at luge ud Russells kort eller mellemlang "broget række." Yderligere forskning bliver gennemført af algoritmen af de primære afgrøder på dem. Kolonier af Shigella onsdag Ploskireva vokse i form af transparente, farveløse og små kolonner. De er af to typer:

• fladtrykt med takkede kanter;
• afrundet, konveks, med en typisk våd glans.

Tre eller fire kolonier skal mikroskopirovat og undersøges for mobilitet. Hvis sidstnævnte ikke dukker op, flyttede de onsdag Olkenitskogo at isolere en ren kultur. I fravær af karakteristiske kolonier Shigella eller hvis der ikke observeres nogen vækst overhovedet, er det nødvendigt at Endo-agar eller Ploskireva producere podning af selenitovogo bouillon. Hvis de typiske kolonier er til stede i tilstrækkeligt antal, sætte den anslåede agglutination. En blanding af sera sonnei og Flexner, reaktionen foregår på glasset.

yderligere forskning

På den tredje dag er der ændringer der er sket i kolonierne på mediet Russells. Hvis der er en kultur, der ikke nedbryder lactosen og glucose gærer at producere en syre, er det adskilt og analyseret, tilbringer mikroskopi, samt foretage såning i "broget rækken", men denne gang udvidet. Bare sætte agglutinationsreaktionen, med henblik på at serologisk identifikation.

På den sidste dag, kan det konkluderes på baggrund af ændringer i "broget nummer" (hvis der er gæring af kulhydrater), såvel som opsummerer agglutination reaktion.

Opbevaring og forberedelse

Fremstilling af agar Ploskireva sker på følgende måde:

1. 55 g tørstof omrøres i en liter destilleret vand.
2. Kogt i to til tre minutter, indtil agaren ikke er endnu helt smeltet.
3. Hæld i petriskåle (sterilitet valgfrit) lag på 5-6 mm.
4. Pladerne holdes åben i en halv time ved stuetemperatur (18-25 grader). Efter dette tidsrum mediet er tilstrækkelig hærde og tørre.

Onsdag Ploskireva lysfølsom og hygroskopisk. Pulveret bør opbevares i en forseglet emballage, skal den relative luftfugtighed i rummet ikke overstige 60%. Den optimale temperatur for opbevaring på 2 ° C til 25 ° C. Opbevaring skal overholde disse regler, ellers mulige unøjagtige resultater.