Serologiske test: typer, brug

Laboratoriediagnostik af stort set alle infektionssygdomme er baseret på påvisning af blod i patientens antistoffer, som er produceret af patogenet antigen, serologiske metoder. De gik ind medicinsk praksis i slutningen af det nittende - begyndelsen af det tyvende århundrede.

Udviklingen af videnskaben har været med til at definere den antigene struktur af mikrober og kemiske formler for deres toksiner. Det er muligt ikke kun at skabe terapeutisk men også diagnostisk serum. De fremstilles ved indgivelse svækkede patogener laboratoriedyr. Efter flere dages neddypning blod kaniner eller mus fremstillede produkter, der anvendes til identifikation af bakterier eller deres toksiner under anvendelse af serologiske tests.

Den ydre manifestation af denne reaktion afhænger betingelserne for dets formulering og det aktuelle antigener i patientens blod. Hvis mikroorganismer er uopløselige partikler, de bundfælde, lyseret, immobiliseret eller bundet i serum. Hvis antigenerne er opløselige, fremgår fænomenet neutralisering eller udfældning.

agglutination (PA)

Serologisk agglutination er meget specifik. Det er let at udføre og er helt klart for hurtigt at opdage tilstedeværelsen af antigener i patientens serum. Det anvendes til indstilling Vidal reaktion (diagnosticering af tyfus og paratyfus) og Weigl (tyfus).

Den er baseret på en specifik interaktion mellem humane antistoffer (eller agglutininer) og mikrobielle celler (agglyutenogenami). Efter deres interaktion dannes partikler, der udfældes. Dette er et positivt tegn. For indstilling reaktion kan anvendes levende eller døde mikrobielle midler, svampe, protozoer, blodceller og somatiske celler.

Kemisk reaktion er opdelt i to faser:

1. Specifikke antistoffer forbindelse (AT) med antigener (Ag).
2. Uspecifik - aflejring af konglomerater AG-AT, dvs. dannelsen af agglutinatet.

Reaktion indirekte agglutination (TPHA)

Denne reaktion er mere følsom end den foregående. Det anvendes til diagnose af sygdomme forårsaget af bakterier, intracellulære parasitter, protozoer. Det er så specifik som kan detektere selv meget lave koncentrationer af antistoffer.

For sin formulering ved anvendelse af oprenset fåremælk røde blodlegemer og røde blodceller af human forbehandlet med antistoffer eller antigener (det afhænger af hvad lab ønsker at finde). I nogle tilfælde, humane røde blodlegemer behandlet med immunglobuliner. Serologiske respons af erythrocytter anses for gyldig, hvis udfældning deraf forekom ved bunden af røret. Den positive reaktion kan vi sige, når cellerne er anbragt i form af et omvendt paraply, besætter hele bunden. Den negative reaktion er scoret, da de røde blodlegemer bundfælde i form af en søjle eller knapper i midten af bunden.

udfældningsreaktion (RP)

Serologiske reaktioner af denne type tjener til at identificere ekstremt små partikler antigener. Dette kan for eksempel proteiner (eller dele deraf) kan forbindelser med proteiner med lipider eller carbohydrater, en del af bakterierne og deres toksiner.

Sera til reaktionen opnås ved kunstig angreb af dyr, typisk kaniner. I denne metode, kan du få absolut enhver fældningen serum. Staging serologisk udfældning samme virkningsmekanisme på agglutinering. Antistofferne indeholdt i serum binder til antigener i kolloide opløsning til dannelse af store proteinmolekyler, der aflejres på bunden af røret eller på substratet (gel). Denne fremgangsmåde anses for at være meget specifikke og kan detektere selv spormængder af stoffet.

Bruges til at diagnosticere pest, tularæmi, miltbrand, meningitis og andre sygdomme. Også involveret i retsmedicinsk undersøgelse.

Gel Fældningsprøve

Serologiske test kan udføres, ikke kun i et flydende medium, men i agarosegelen. Dette kaldes diffus udfældningsmetode. Med det, studere sammensætningen af komplekse antigene blandinger. Denne metode er baseret på kemotaksi af antigener til antistoffer og omvendt. Gelen de bevæger sig mod hinanden med forskellig hastighed og møde til dannelse nedbør linjer. Hver linie - et sæt K-AT.

Neutralisation exotoksin antitoksin (RN)

Antitoksisk serum kan neutralisere exotoksin som mikroorganismer producerer. Baseret på disse data og serologiske tests. Mikrobiologi anvender denne fremgangsmåde til titrering af sera, toksiner og toksoider, såvel som deres terapeutiske aktivitet. Styrken af neutralisering af toksinet bestemmes af de konventionelle enheder - AE.

Desuden kan på grund af denne reaktion, hvilken art eller typer tilhørende exotoxin. Det anvendes i diagnosen af stivkrampe, difteri, botulisme. Undersøgelsen kan udføres "på glasset", og i en gel.

lysis reaktion (RL)

Immunserummet, som kommer ind i patientens legeme, har, bortset fra dets vigtigste funktion af passiv immunitet, selv og lytiske egenskaber. Det er i stand til at opløse mikrobielle midler, cellulære og fremmede elementer virus ind i patientens legeme. Afhængigt af specificiteten af antistofferne medtaget i serum isoleret bactericidin, cytolysiner, spirohetoliziny, hæmolysiner og andre.

Disse specifikke antistoffer kaldes "komplement". Det findes i næsten alle kropsvæsker, det har en kompleks proteinstruktur og er meget følsom over for temperaturstigning, rystet syrer og direkte sollys. Men i tørret tilstand er i stand til at opretholde deres lytiske egenskaber på op til seks måneder.

Der er nogle former for serologiske test af denne type:

- bakteriolyse;

- hæmolyse.

Bakteriolyse udføres ved hjælp af patientens blodserum og specifik immun serum med levende bakterier. Hvis, Derefter forskeren ser lysis af bakterierne, og reaktionen vil blive betragtet som et tilstrækkeligt antal positive komplement er til stede i blodet.

Den anden blod serologiske respons er, at suspensionen af erythrocytter behandlet patientserum indeholdende hæmolysiner, der aktiveres kun i tilstedeværelsen af en særlig kompliment. Hvis der er en, så laboratoriet ser opløsningen af røde blodlegemer. Denne reaktion er meget udbredt i moderne medicin til bestemmelse af titeren af komplement (dvs. dets mindste mængde fremkalder lyse af røde blodlegemer) i blodet serum og til fremstilling af komplement bindingsassay. Det var på denne måde udføres serologisk reaktion for syfilis - Wasserman.

komplementfiksering (RSK)

Denne reaktion anvendes til at måle serum-antistoffer til patienten af et infektiøst middel såvel som at identificere afsenderen af dets antigene struktur.

Op til dette punkt har vi beskrevet en simpel serologiske test. RAC anses for vanskelige reaktion, da den interagerer ikke to, men tre elementer: et antistof, et antigen og komplement. Dens essens ligger i det faktum, at interaktionen mellem antistoffet og antigenet forekommer kun i nærværelse af proteiner komplimenterer som er adsorberet på overfladen af det dannede kompleks K-AT.

Selv antigener efter tilsætning af komplement, underlagt væsentlige ændringer, der angiver kvaliteten af reaktionen. Dette kan være lyse, hæmolyse, immobilisering, baktericide eller bakteriostatiske virkning.

Selve reaktionen sker i to faser:

1. Dannelsen af antistof-antigen, som ikke visuelt mærkbar forsker.
2. Ændring af antigenet under indvirkning af komplement. Denne fase normalt kan spores tilbage til det blotte øje. Hvis det visuelle respons ikke er synlig, derefter bruge ekstra indikator, der tillader at påvise ændringer.

indikatorsystem

Denne reaktion er baseret på binding af komplement. Den reagensglas time efter indstilling RSK tilsat oprensede fåreerythrocytter og serum hæmolytisk ikke indeholder komplement. Hvis røret blev efterladt ubundet komplement, vil det slutte den komplekse N-AT dannet mellem fårene blodlegemer og hæmolysin, og forårsage deres opløsning. Dette ville betyde, at DGC er negativ. Hvis røde blodlegemer forblev intakte, så derfor er reaktionen positiv.

hæmagglutination (RHA)

Der er to fundamentalt forskellige hæmagglutinering. En af dem - serologisk, anvendes til bestemmelse af blodtyper. I dette tilfælde erythrocytter interagere med antistoffer.

Og den anden reaktion er ikke relateret til serologisk, eftersom røde blodlegemer reagerer med hæmagglutinin fremstillet af virus. Da hver exciter kun virker på specifikke erythrocytter (kylling, får, abe), kan vi antage denne reaktion snævert afgrænset.

Klar positiv eller negativ reaktion, er det muligt, at placeringen af blodlegemerne i bunden af røret. Hvis de figur ligner en omvendt paraply, derefter den ønskede virus er til stede i patientens blod. Og hvis alle de røde blodlegemer formet som en mønt kolonner, der er ingen ukendte patogener.

Omsætning af hæmagglutinationsinhiberings (HAI)

Denne yderst specifik reaktion, som gør det muligt at etablere form, type virus eller tilstedeværelsen af specifikke antistoffer i serummet fra patientens blod.

Dens essens ligger i det faktum, at de tilsatte til røret indeholdende testmaterialet antistoffer, forhindrer aflejring af antigener på erytrocytter, derved stoppe hæmagglutination. Dette er en kvalitativ indikation af tilstedeværelsen af specifikke antigener i blod til en bestemt ønsket virus.

Reaktion immunofluorescens (RIF)

Omsætningen er baseret på evnen til at identificere komplekser med AT-AH fluorescensmikroskopi efter behandling flyuorohromnymi farvestoffer. Denne fremgangsmåde er enkel at anvende, ikke kræver isolering af ren kultur og tager lidt tid. Det er en forudsætning for den hurtige diagnose af smitsomme sygdomme.

I praksis er disse serologiske tests opdelt i to kategorier: direkte og indirekte.

Direkte RIF produceret antigen, der har været forarbejdet fluorescerende serum. Og Indirekte er, at lægemidlet først behandles med konventionel diagnosticum omfatter antistoffer mod det ønskede antigen og derefter genpåføres fluorescerende valle, der er specifikke for proteinerne i komplekset K-AT, og mikrobielle celler bliver synlige ved mikroskopi.